:: دوره 22، شماره 1 - ( بهار 1391 ) ::
جلد 22 شماره 1 صفحات 38-32 برگشت به فهرست نسخه ها
کلونینگ و بیان پروتئین فاکتور رشد جفتی-1 انسانی (hPLGF-1) در سیستم بیانی Rosetta E.coli
نرگس اربابی1 ، مهدی بهدانی2 ، مجید گل کار3 ، سیدحمید آقایی بختیاری2 ، حسین خان احمدشهرضا4 ، رضا مهدیان 5
1- دانشگاه آزاد اسلامی، واحد علوم و تحقیقات تهران
2- مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، انستیتو پاستور ایران
3- انستیتو پاستور ایران
4- انستیتو پاستورایران
5- مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، انستیتو پاستور ایران ، rezamahdian@yahoo.com
چکیده:   (19220 مشاهده)
سابقه و هدف: آنژیوژنزیس یا شکل گیری عروق خونی جدید در شرایط فیزیولوژیک و پاتولوژیک مهم ترین عامل رشد و تکثیر سلول ها است. پروتئین PLGFیا فاکتور رشد جفتی یکی از مهم ترین پروتئین ها در تحریک آنژیوژنزیس است. در این پژوهش، ژن PLGF-1 انسانی از بافت جفت جدا شده و پروتئین مورد نظر در سیستم باکتریایی بیان شد.
روش بررسی: دراین مطالعه تجربی، ناحیه کد کننده ژن PLGF-1 از بافت جفت انسان توسط پرایمرهای اختصاصی تکثیر شد. قطعه ژنی مورد نظر در پلاسمیدهای pET28a و pET32a کلون شد. پلاسمیدهای نوترکیب pET28a-PLGF-1 و pET32a-PLGF-1 به باکتری E.coli Rosetta منتقل شدند و بیان پروتئین نوترکیب توسطIPTG القاء گردید. بیان پروتئین نوترکیب و محلولیت آن با SDS-PAGE بررسی و با روش وسترن بلاتینگ هویت آن تائید شد.
یافته ها: مراحل طراحی و ساخت سازه ژنی pET28a-PLGF-1 و pET32a-PLGF-1 با موفقیت انجام و توالی ژن PLGF-1 تأیید گردید. باکتریهای القاء شده با IPTG پروتئین PLGF-1 را بیان کردند و توسط وسترن بلاتینگ به تایید رسید. همچنین پروتئین نوترکیب PLGF-1 تقریبا به صورت نامحلول بیان شد.
 نتیجه گیری: پروتئین PLGF-1 به خوبی در سیستم بیانی RosettaE.coliبیان می‌شود و می‌توان از این پروتئین نوترکیب در تست-های مختلف استفاده نمود.
واژه‌های کلیدی: آنژیوژنزیس، کلونینگ و بیان، فاکتور رشد جفتی -1انسان
متن کامل [PDF 789 kb]   (5301 دریافت)    
نيمه آزمايشي : تجربي | موضوع مقاله: ژنتيك
دریافت: 1391/1/15 | انتشار: 1391/1/27


XML   English Abstract   Print



بازنشر اطلاعات
Creative Commons License این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است.
دوره 22، شماره 1 - ( بهار 1391 ) برگشت به فهرست نسخه ها